鵝細(xì)小病毒與鴨圓環(huán)病毒混合感染對(duì)鴨的影響
日期：2025-07-31 來源： 鴨高創(chuàng)咨詢公眾號(hào)
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鵝細(xì)小病毒（GPV）可引起番鴨幼雛和雛鵝患上小鵝瘟，發(fā)病率和死亡率較高。該病毒可引起厭食、水樣腹瀉和發(fā)育遲緩。感染后不到一周的雛鵝死亡率高達(dá)100%。此外，GPV還可引起短喙侏儒綜合征（SBDS），該綜合征于1971年在法國(guó)的騾鴨群中首次報(bào)道。SBDS的臨床癥狀是生長(zhǎng)遲緩、舌頭突出和脛骨短而粗，其特點(diǎn)是發(fā)病率和死亡率較低。自2015年以來，有報(bào)道稱GPV導(dǎo)致中國(guó)櫻桃谷鴨患上SBDS。
鴨圓環(huán)病毒 (DuCV) 屬于圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬，最初報(bào)道于德國(guó)一家農(nóng)場(chǎng)的兩只6周齡雌性騾鴨中；兩只鴨均出現(xiàn)羽毛脫落異常且身體狀況不佳。DuCV感染可能使宿主易患免疫抑制，而與其他細(xì)菌和病毒病原體的共同感染會(huì)進(jìn)一步加劇病情進(jìn)展。例如，一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，感染 DuCV 的鴨更容易感染鴨疫里默氏桿菌、大腸桿菌、鴨肝炎病毒1型。由于缺乏用于病毒擴(kuò)繁的細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)，因此人們對(duì)DuCV的分子生物學(xué)和發(fā)病機(jī)制知之甚少。為了明確表征與 DuCV 感染相關(guān)的疾病，需要合適的動(dòng)物模型。
流行病學(xué)調(diào)查顯示，SBDS中存在的GPV和DuCV在中國(guó)東部地區(qū)鴨群中很常見，鴨群中SBDS的致病性已得到證實(shí)。盡管GPV已被證實(shí)為鴨SBDS的病原體，但該病很少通過實(shí)驗(yàn)感染再現(xiàn)。尚不清楚DuCV 是否與 GPV 產(chǎn)生協(xié)同作用，并影響兩種病毒的復(fù)制和致病性。
在本文中研究人員通過建立肉鴨的共感染模型，并評(píng)估了病毒在鴨中的復(fù)制和致病性，以了解 GPV 和 DuCV 之間的協(xié)同作用。
研究人員將60只2日齡雛鴨分成4組。鴨子腹腔接種方法見表1。對(duì)照組不予治療。感染后10、20、30天（即10dpi、20dpi、30dpi），每組隨機(jī)選取3只鴨子處死，取組織樣本進(jìn)行組織病理學(xué)（肝臟、腎臟、十二指腸、脾臟、胸腺、法氏囊和骨髓）、免疫組化及病毒載量分析（心臟、肝臟、肺臟、腎臟、十二指腸、脾臟、胸腺、法氏囊和骨髓）。感染后每5天測(cè)量一次體重。
2. 試驗(yàn)結(jié)果
2.1 體重和肉眼病變
兩種病毒都對(duì)鴨子生長(zhǎng)性能造成不同程度的影響，導(dǎo)致生長(zhǎng)遲緩和體重增加較差，以至于鴨子的體重僅為無病毒鴨子的60%。從10dpi 開始，增重率顯著下降（圖 1）。在剖檢（10、20、30 dpi）時(shí)，嚴(yán)重的胸腺萎縮、輕度至中度的脾臟和法氏囊萎縮、骨髓和脾臟蒼白以及肝壞死是感染鴨子的常見病變。當(dāng)比較組織的大小和顏色時(shí)發(fā)現(xiàn)，病變隨著時(shí)間的推移而變得更加嚴(yán)重，并且GPV和DuCV共同感染引起的疾病嚴(yán)重程度比單獨(dú)感染GPV或DuCV更為嚴(yán)重（圖2）。組織病理學(xué)最主要的病變?cè)诟闻K、腎臟、法氏囊、骨髓、脾臟、胸腺和十二指腸。
肝臟：GPV感染組出現(xiàn)局灶性空泡變性、肝細(xì)胞壞死和淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。在DuCV感染組中觀察到肝空泡變性和炎癥灶。在混合感染組中，肝空泡變性更嚴(yán)重，大面積肝細(xì)胞崩解、結(jié)構(gòu)丟失，并有出血。
腎臟：GPV感染組和DuCV感染組腎小管上皮細(xì)胞均出現(xiàn)輕至中度空泡變性，混合感染組腎小管上皮細(xì)胞變性嚴(yán)重，壞死、脫落，大量異嗜性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。
十二指腸：GPV感染組可見絨毛脫落、淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，DuCV感染組未見明顯病變，混合感染組可見絨毛壞死脫落、出血，腺管上皮細(xì)胞萎縮，淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。
合并感染組免疫器官（脾臟、胸腺、法氏囊、骨髓）病變較單感染組嚴(yán)重，包括淋巴細(xì)胞減少、出血、嗜異性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，骨髓、胸腺、脾臟組織細(xì)胞減少，胸腺小體崩解。
圖 2. 感染鴨的大體病變。在 GPV 和 DuCV 共感染組中，它們表現(xiàn)為嚴(yán)重的胸腺萎縮、輕度至中度的脾臟和法氏囊萎縮、骨髓和脾臟蒼白以及肝壞死。比例尺=1厘米。
2.2 組織中病毒載量
通過qPCR檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)組織（心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、十二指腸、胸腺、法氏囊和骨髓）中GPV和DuCV載量，觀察病毒在體內(nèi)復(fù)制的動(dòng)態(tài)變化?；旌细腥窘M的脾臟、肺臟和十二指腸30 dpi水平較20 dpi水平下降（P< 0.001），而在腎臟和骨髓中升高（P< 0.01）。GPV感染組和混合感染組的心臟、肝臟、胸腺和法氏囊中的GPV積累保持在與之前相同的水平。除肝臟外，共感染組組織中GPV含量顯著高于GPV單感染組（P < 0.05）（圖3F）。感染初期，共感染組DuCV和GPV復(fù)制均受到抑制。但隨著感染進(jìn)程的發(fā)展，兩種病毒的復(fù)制在該組織中協(xié)同增加，比單獨(dú)感染的病毒載量更高。
2.3 病毒在鴨組織中的分布
用IHC檢測(cè)GPV和DuCV在體內(nèi)的分布和定位，在肝臟、脾臟、腎臟、十二指腸和法氏囊中檢測(cè)到陽(yáng)性細(xì)胞。隨著感染時(shí)間延長(zhǎng)，肝臟、十二指腸、脾臟陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)增多，混合感染組陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)合并感染組在10 dpi和20 dpi的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)均低于單一感染組,但在30 dpi時(shí)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)高于單一感染組;由于淋巴細(xì)胞的耗竭,法氏囊內(nèi)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)減少,但信號(hào)強(qiáng)度增加。
據(jù)報(bào)道GPV引起鴨子顯著的生長(zhǎng)遲緩、厭食和腹瀉，而DuCV感染鴨子的癥狀則以生長(zhǎng)遲緩和羽毛脫落為特征。
本研究證明了GPV和DuCV對(duì)鴨子具有感染協(xié)同作用。與單一感染組相比，混合感染的致病性明顯增強(qiáng)，對(duì)鴨的生長(zhǎng)發(fā)育影響更為嚴(yán)重，臨床癥狀和病理改變也更為嚴(yán)重。主要病變?yōu)楦闻K、腎臟、十二指腸變性、壞死、出血，淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，脾臟、胸腺、法氏囊等免疫器官萎縮，骨髓和組織細(xì)胞丟失。DuCV和GPV感染的特征性病變均出現(xiàn)，但以免疫器官的病變最嚴(yán)重。肝臟、腎臟作為主要的代謝器官，病變較為嚴(yán)重，病毒載量較高。
此外，本研究顯示GPV和DuCV共感染具有協(xié)同促進(jìn)體內(nèi)復(fù)制的作用。在病毒協(xié)同作用中，病毒復(fù)制、細(xì)胞病理改變、組織趨向性、宿主范圍以及一種或兩種病毒的傳播率等生物學(xué)性狀都發(fā)生了改變。
在10 dpi時(shí)，GPV和DuCV單感染組的大多數(shù)組織中的病毒載量高于共感染組。在30 dpi時(shí)，DuCV感染組的DuCV載量降低，而共感染組的DuCV載量繼續(xù)升高。GPV單感染組的病毒載量顯著下降，而共感染組的病毒載量略有下降，且在20和30 dpi均高于單感染組。
10 dpi時(shí)，共感染組僅脾臟中的DuCV負(fù)荷和胸腺、法氏囊和肺臟中的GPV負(fù)荷高于單感染組，說明病毒首先在免疫器官中大量復(fù)制并誘發(fā)病變。共感染組肺臟中GPV含量持續(xù)較高，而DuCV含量不高，說明GPV與DuCV共感染導(dǎo)致血液含量高的組織對(duì)GPV更易感，僅增加該病毒的復(fù)制。20 dpi時(shí)，共感染組的脾臟中GPV病毒載量最高。30 dpi時(shí)，骨髓中GPV復(fù)制是單感染組的43倍。
DuCV是一種免疫抑制病毒，它削弱宿主的免疫反應(yīng)，使其易受繼發(fā)感染。近年來GPV作為SBDS的病原體被廣泛研究，但目前實(shí)驗(yàn)室感染的成功率僅為20%～35%。針對(duì)這一問題，我們?cè)谝巴庹{(diào)查病例，發(fā)現(xiàn)GPV與DuCV在鴨中混合感染率較高，尤其在SBDS中。同樣，在觀賞鴨中也發(fā)現(xiàn)鵝圓環(huán)病毒（GoCV）與GPV混合感染，死亡率較高。由于實(shí)驗(yàn)室感染與自然感染條件不同，且DuCV與GPV在鴨體內(nèi)的潛伏期較短，本研究中的鴨子均未發(fā)現(xiàn)SBDS癥狀，但DuCV與GPV表現(xiàn)出協(xié)同致病作用。目前對(duì)鴨病DuCV與GPV混合感染混合感染的研究較少，DuCV感染的發(fā)病機(jī)制尚不明確，根據(jù)已報(bào)道的研究和資料，細(xì)胞凋亡可能在圓環(huán)病毒感染的發(fā)病機(jī)制中起重要作用。本研究發(fā)現(xiàn)混合感染鴨的脾臟和法氏囊中淋巴細(xì)胞數(shù)量減少，IHC信號(hào)強(qiáng)度增強(qiáng)。GPV和DuCV共感染致病性增強(qiáng)可能是由于DuCV誘導(dǎo)免疫細(xì)胞凋亡，導(dǎo)致免疫抑制和生長(zhǎng)停滯，使鴨對(duì)GPV更敏感，促進(jìn)病毒在鴨組織中復(fù)制，從而加重病情。
GPV和DuCV的混合感染顯著抑制了鴨的生長(zhǎng)發(fā)育，并導(dǎo)致免疫器官萎縮、蒼白，肝臟壞死。GPV和DuCV在混合感染的鴨中協(xié)同增強(qiáng)了致病性。感染初期，混合感染鴨體內(nèi)兩種病原體的病毒載量顯著低于單一感染鴨隨著感染進(jìn)程的進(jìn)展，混合感染鴨體內(nèi)GPV和DuCV的載量顯著高于單一感染鴨。病毒在肝臟、腎臟、十二指腸、脾臟和法氏囊中的分布范圍擴(kuò)大，與GPV和DuCV混合感染鴨體內(nèi)病毒載量的增加相一致。結(jié)果表明GPV和DuCV在混合感染鴨體內(nèi)具有協(xié)同增強(qiáng)復(fù)制和致病性的效應(yīng)。
參考文獻(xiàn)：Liu J , Yang X , Hao X ,et al.Effect of goose parvovirus and duck circovirus coinfection in ducks[J].Journal of Veterinary Research, 2020.DOI:10.2478/jvetres-2020-0048.